檢測內(nèi)精度

檢測內(nèi)精度：一般是檢測孔板間的重復(fù)性。一般用變異系數(shù)CV值來評估，變異系數(shù)(CV)為標(biāo)準(zhǔn)差σ與平均數(shù)µ的比值。每個樣品的 %CV 通常應(yīng)小于 10%，%CV越大代表孔間差異大，重復(fù)性不好，結(jié)果不可信。

注：CV較大可由以下原因引起: 移液不準(zhǔn)確；在使用前確保槍頭在移液器上套牢，確保吸取正確的液體量；試劑濺入其他孔中；樣本或試劑受細(xì)菌或真菌污染；試劑間交叉污染；酶標(biāo)板各處溫度不一致，確保酶標(biāo)板在遠(yuǎn)離氣流的恒溫環(huán)境中孵育；部分孔干透，確保酶標(biāo)板在孵育過程中始終處于被封蓋狀態(tài)。

稀釋線性度

稀釋線性度：稀釋線性度是指不同稀釋水平下測試樣品的結(jié)果精度。不同稀釋倍數(shù)下的測量值與精確值的比值應(yīng)該在70%-130%之間。

在沒有基質(zhì)干擾時，無論如何稀釋，測量值都和真實值吻合。而有基質(zhì)干擾時，樣品稀釋會導(dǎo)致基質(zhì)被稀釋，會造成非特異性結(jié)合比例的減少，測量值也會隨稀釋倍數(shù)的改變而改變。

回收率

回收率：回收率用于確定目標(biāo)物質(zhì)檢測是否受樣品基質(zhì)差異的影響。例如，待測上清液中所含的大量蛋白質(zhì)可能會阻礙抗體結(jié)合，提高信噪比，從而導(dǎo)致目標(biāo)物質(zhì)檢測的濃度低于實際值。通過將已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)加入到不同的樣品基質(zhì)中來確定回收率。如果平均回收率為 80%-120%，則認(rèn)為樣品基質(zhì)對檢測準(zhǔn)確定量分析物的能力影響最小。回收率=用基質(zhì)稀釋的目標(biāo)物質(zhì)的檢測值/用基質(zhì)稀釋的目標(biāo)物質(zhì)的確定值*100%。

回收率過高或是過低，則提示實驗體系受到較大的復(fù)雜基質(zhì)干擾。比如在空白血清中摻入了 1000 pg/mL 的 IL-2，回收率只有 50%，提示血清中有干擾因素影響了抗體與 IL-2 分子的結(jié)合。

靈敏度（檢測限）

靈敏度（檢測限）：靈敏度指可與背景區(qū)分的低分析物水平，通常稱為分析靈敏度或檢測限。一般有三個指標(biāo)，分別為LOB，LOD，LOQ。

LOB(Limit of blank), 就是我們通常講的空白檢測限。LOB指的是用空白樣本去測試，在一定的概率下能測得的最高測量結(jié)果。

LOD(Limit of detection), 就是我們通常講的檢測限，就不是用空白樣本去檢測了，是對低濃度的分析物樣本進(jìn)行測試，在一定的概率的條件下能測得的低值。

LOQ(Limit of quantitation), 就是我們通常講的定量限，這個也是用低濃度的分析物樣本進(jìn)行測試得出的較低的值，這個值的準(zhǔn)確性是有要求的，就是不光要能測到，而且還要保證結(jié)果是準(zhǔn)確的。

打個比方：比如遠(yuǎn)處一個物體，隨著距離的縮短，你的眼睛從看不見（空白檢測限）到能看見（檢測限），最后到能確認(rèn)是什么物體（定量限）。

信噪比

信噪比（Signal/Noise, S/N）就是信號與噪音的比值，也就是樣品數(shù)據(jù)與空白數(shù)據(jù)的比值。一般以信噪比為 3 : 1 時相應(yīng)濃度或量確定檢測限， 10：1時的量為定量限。

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