在生物制藥實(shí)驗(yàn)中，準(zhǔn)確和可靠地測(cè)定藥物的含量是非常重要的。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，以下是一些實(shí)驗(yàn)技巧和注意事項(xiàng)：
1. 過濾溶液：當(dāng)乙醇溶解主成分后，輔料不能溶解，并需要過濾。離心方法是一種常用的過濾方法，通過離心使輔料沉淀，并取上清液。注意，在離心過程中，部分離心管沒有塞子，可以使用柔軟的塑料薄膜袋和橡皮筋代替。與薄膜過濾法相比，離心過濾法不會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。此外，如果過濾操作不夠快速，乙醇易揮發(fā)，可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。
2. 超聲波分散：在檢驗(yàn)吲噠帕胺片的含量時(shí)，使用超聲波超聲可以使片劑更易分散，可以溶解主成分，并且沒有浪費(fèi)。與研磨轉(zhuǎn)移方法相比，超聲波分散對(duì)含量均勻度測(cè)定沒有影響，且更簡(jiǎn)單方便。
3. 控制溶劑濃度：在檢測(cè)中藥材的浸出物時(shí)，一定要按照標(biāo)準(zhǔn)控制好溶劑的濃度（如乙醇等），否則檢驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)有很大的差異。
4. 對(duì)照品與供試品混合：在液相鑒別中，當(dāng)供試品與對(duì)照品出峰時(shí)間不一致時(shí)，無法判斷是否合格?？梢詫?duì)照品與供試品各半配成混合溶液后進(jìn)行進(jìn)樣，如果峰寬未變寬，未出現(xiàn)駝峰，則可判斷為合格。
5. 考慮理化性質(zhì)分離雜質(zhì)：在進(jìn)行原料殘留物檢測(cè)時(shí)，如果主藥對(duì)雜質(zhì)有干擾，現(xiàn)有方法無法檢出。在自建方法時(shí)，要優(yōu)先考慮利用理化性質(zhì)將雜質(zhì)分離出來，然后再進(jìn)行測(cè)定，往往會(huì)取得意想不到的效果。
6. 生物制藥實(shí)驗(yàn)中要考慮展開劑的溫度與配制順序：在進(jìn)行藥材薄層色譜鑒別時(shí)，應(yīng)該考慮展開劑的溫度與配制順序。有時(shí)，這可能會(huì)對(duì)色譜的結(jié)果產(chǎn)生影響。
7. 非規(guī)定色譜柱和調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度：在進(jìn)行有機(jī)溶劑殘留量檢查時(shí)，不一定要堅(jiān)持使用規(guī)定的色譜柱。通常情況下，DB-624色譜柱可以滿足要求。此外，取樣量也可以靈活調(diào)整，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度根據(jù)限度進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整即可。
8. 飽和時(shí)間要夠：在進(jìn)行薄層色譜鑒別時(shí)，飽和時(shí)間一定要夠長(zhǎng)。
9. 控制流動(dòng)相pH值：在使用HPLC測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)，如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽，一定要注意其pH值。因?yàn)樵诜胖眠^程中，流動(dòng)相的pH值可能會(huì)發(fā)生變化，而某些藥物對(duì)這種變化非常敏感。
10. 控制溫度：在使用HPLC測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)，溫度的控制極其重要。最好使用帶有柱溫箱的設(shè)備，如果沒有，則需在裝置中保持恒溫后再進(jìn)行測(cè)定，否則可能出現(xiàn)基線飄移，結(jié)果不準(zhǔn)確。
11. 特定品種對(duì)溫度敏感：某些藥物對(duì)溫度的影響非常大。例如，有些品種的對(duì)照品溶液不能放在冰箱中，甚至需要在液相室內(nèi)開空調(diào)，并在第二天才能使用。
12. 使用微量移液槍要注意"重壓輕打"：在使用微量移液槍時(shí)，要注意正確施加力量，以確保加液的準(zhǔn)確性。
13. 分液加速：在進(jìn)行一些乳膏的含量測(cè)定時(shí)，常使用提取分液。在分液時(shí)，如果兩相的分界不清晰，可以加入少量的飽和氯化鈉溶液。這樣可以使分層更加明顯。
14. 強(qiáng)調(diào)溶解時(shí)間：呋喃唑酮溶解較慢，溶解時(shí)間一定要足夠長(zhǎng)。
15. 避免干擾峰：在使用HPLC測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)，最好使用流動(dòng)相溶解樣品。否則，容易產(chǎn)生干擾峰，影響結(jié)果。特別注意可能出現(xiàn)的倒峰情況。
16. 分層加速：在低溫環(huán)境下進(jìn)行中藥制劑的萃取時(shí)，往往會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，即兩相不容易分層。這時(shí)可以加入少量的飽和氯化鈉溶液，或者使用電吹風(fēng)對(duì)分液漏斗進(jìn)行加溫，或者用熱抹布覆蓋，可以加速分層過程。
17. 注意試劑的含水量：在非水滴定中，試劑的含水量對(duì)結(jié)果有較大影響。例如，更換不同廠家的冰醋酸，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能會(huì)有差異。
18. 加快過濾速度：對(duì)于比較稠或量少的中藥制劑溶液，在濾紙過濾之前，可以先通過離心使其分層，然后再過濾。這樣可以加快過濾速度，減少有機(jī)溶劑的揮發(fā)（尤其是在環(huán)境溫度較高時(shí)）。
19. 清洗檢測(cè)器：在使用高效液相色譜儀測(cè)定人參、麻黃的含量時(shí)，由于檢測(cè)波長(zhǎng)為邊緣波長(zhǎng)（如203nm、207nm），通常一次檢測(cè)不能成功。尤其是在使用一段時(shí)間后，檢測(cè)器效果可能會(huì)下降?？梢孕兜羯V柱，直接連接檢測(cè)器，使用0.1%鹽酸清洗檢測(cè)池4小時(shí)，效果會(huì)有所改善。
20. 使用色譜純?cè)噭┨幚恚涸谑褂酶咝б合嗌V儀測(cè)定含量時(shí)，可以使用色譜純?cè)噭┨幚韺?duì)照品和樣品，以減少誤差。
以上是一些生物制藥實(shí)驗(yàn)中的實(shí)驗(yàn)技巧和注意事項(xiàng)，這些技巧和注意事項(xiàng)的應(yīng)用可以提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。正確的實(shí)驗(yàn)操作和細(xì)致的注意事項(xiàng)對(duì)于藥物研究和開發(fā)較為重要。更多實(shí)驗(yàn)室儀器、實(shí)驗(yàn)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)耗材、實(shí)驗(yàn)試劑可以進(jìn)入蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材網(wǎng)站進(jìn)行了解。
