隨著癌癥研究的不斷深入，融合基因被認(rèn)為是癌癥發(fā)生的主要原因之一。而快速準(zhǔn)確地對融合基因進行檢測，則能夠指導(dǎo)醫(yī)學(xué)的研究方案選擇。然而，目前存在的分子檢測方法在分辨率和通量方面受到一定的限制。而靶向RNA-seq技術(shù)，通過使用生物素化寡核苷酸探針來富集目標(biāo)RNA轉(zhuǎn)錄本，能夠克服這些限制，實現(xiàn)對融合基因的敏感檢測。
傳統(tǒng)的融合基因檢測方法主要包括Fluorescence in situ hybridization（FISH）和實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）。然而，這些方法只能檢測單個融合基因，無法識別新的融合基因伴侶或解析復(fù)雜的結(jié)構(gòu)重組。而靶向RNA-seq技術(shù)可以克服這些限制，其敏感度高，能夠檢測到罕見或較低表達的轉(zhuǎn)錄本。
靶向RNA-seq的優(yōu)勢在于能夠在一個實驗中靶向捕獲數(shù)百個基因，大大提高了融合基因的檢測率。通過對多個細胞系進行檢測分析，該技術(shù)在檢測融合基因方面表現(xiàn)出更強的優(yōu)勢。例如，在肺癌患者的腫瘤組織中，靶向RNA-seq不僅確認(rèn)了ROS1和ALK的重組現(xiàn)象，還確定了其伴侶基因和融合連接位點。這不僅提高了融合基因的檢測率，還與之前的檢測結(jié)果具有高度的一致性。
另外，靶向RNA-seq技術(shù)還應(yīng)用于其他疾病的融合基因檢測。在慢性髓性白血病者中，靶向RNA-seq確定了與imatinib研究反應(yīng)相關(guān)的BCR-ABL1異構(gòu)體。在前列腺癌者中，靶向RNA-seq識別到了多個TMPRSS2-ERG融合異構(gòu)體，并發(fā)現(xiàn)這些融合異構(gòu)體具有多樣的轉(zhuǎn)錄起始位點。此外，靶向RNA-seq還可以用于統(tǒng)計基因和外顯子的表達，通過讀深變化來識別融合連接位點，并發(fā)現(xiàn)融合基因的發(fā)生可能與基因表達相關(guān)。
為了滿足科研和醫(yī)學(xué)的需要，蘇州阿爾法生物有限公司聯(lián)合海星生物提供了革命性的HyCyte®標(biāo)準(zhǔn)品細胞株定制服務(wù)。該服務(wù)基于成熟的基因編輯系統(tǒng)，包括CRISPR/Cas9基因定點編輯技術(shù)、VIRUS-Free™ 基因穩(wěn)轉(zhuǎn)技術(shù)以及ClonePlus™細胞單克隆技術(shù)。通過這些核心技術(shù)，我們可以快速高效地構(gòu)建多基因多細胞系的突變標(biāo)準(zhǔn)品細胞株，解決多基因多細胞系混合突變頻率不確定的難題。
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